土壤有机磷的测定:灼烧-酸浸提—钼锑抗比色法
一、试剂
(1)4mol/LNaOH
(2)2mol/L(1/2H2SO4)溶液:吸取浓硫酸6mL,加入少量蒸馏水中,边加边搅拌,冷却后加水定容至mL。
(3)磷(P)标准溶液。准确称取℃
烘干的分析纯磷酸二氢钾0.g于小烧杯中,以少量水溶解,加H2SO45mL(防止生长霉菌,可使溶液长期保存),将溶液全部洗入0ml容量瓶中,用水定容至刻度,充分摇匀,此溶液即为含50mg/L的磷标准溶液。吸取25ml此溶液稀释至ml,即为5mg/L的磷标准溶液(此溶液不能长期保存)。比色时按标准曲线系列配制。
(4)硫酸钼锑贮存液。称取分析纯钼酸铵10g溶于ml蒸馏水中。然后缓缓注入分析纯浓硫酸ml,并不断搅拌,冷却至室温。称取0.5g酒石酸锑钾,溶于以上溶液中,最后用蒸馏水稀释至0ml,充分摇匀,贮于棕色试剂瓶中。
(5)二硝基酚指示剂溶液。称取0.25g二硝基酚溶于ml蒸馏水中。此指示剂的变色点约为pH=3,酸性时无色,碱性时呈黄色。
(6)钼锑抗混合显色剂。临用前,在ml钼锑贮存液中,加入1.5g左旋(旋光度+21—+22°)抗坏血酸,此试剂有效期24小时,宜用前配制。
二、主要仪器
高温电炉、电烘箱、分光光度计、瓷坩埚、万分之一分析天平
三、试样的制备
取风干的实验室待测样品充分混匀后,取待测样品充分混匀后,按四分法缩减至g,粉碎,然后全部通过60目孔径筛,装入样品袋备用。
四、分析步骤
4.1试样溶液提取
称取通过60目的风干土壤样品1g,精准至0.g,置于15mL瓷坩埚中,在℃高温电炉内灼烧1h,取出冷却,用0.2moL/L(1/2H2SO4)溶液mL将土样洗入mL容量瓶中。
4.2试样对照溶液提取
取1g同一样品于另外一个mL容量瓶中,加入0.2moL/L(1/2H2SO4)溶液mL。两瓶的溶液摇匀后,分别将瓶塞松放在瓶口上,一起放入40℃烘箱内保温1h。取出,冷却至室温,加水定容,过滤。
4.3试样测定
吸取两瓶的滤液各10.00mL分别放入50mL容量瓶中,用水稀释至约30mL,加二硝基酚指示剂2滴,用NaOH溶液和稀硫H2SO4溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀,用水定容至50mL刻度,摇匀。在室温高于15℃的条件下放置30分钟后,在分光光度计上以nm的波长比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸收值,在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。
4.4.标准曲线的绘制
分别吸取5mg/L标准溶液0,2,4,6,8,10ml于50ml容量瓶中,加水稀释至约30ml,加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。即得0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mg/LP标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值。以吸收值为纵坐标,Pmg/L数为横坐标,绘制成标准工作曲线。
五、结果计算
C—从工作曲线上查得的比色液磷的mg/L数
m—称取土样重量(g)
Vc—吸取滤液的体积
Vt—定容体积(ml)
分别计算出灼烧与未灼烧土壤的含磷量,然后用经灼烧的结果减去未灼烧的结果,其差值即为有机磷含量。
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